產(chǎn)品及特點(diǎn)：
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程，使每個(gè)循環(huán)變得“可見(jiàn)”。本產(chǎn)品就是以探針?lè)晒舛?RT-PCR 技術(shù)為基礎(chǔ)開(kāi)發(fā)的專(zhuān)門(mén)檢測(cè)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒的試劑盒。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
駱駝源性成分探針?lè)≒CR熒光定量試劑盒 | 50次 | EY00P9547 |
運(yùn)輸及保存： 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為12個(gè)月。
自備試劑：樣品 RNA。
分類(lèi)：熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)。
客戶(hù)只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱(chēng)即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
染料法
探針?lè)ā?/font>
可進(jìn)行相對(duì)，定量表達(dá)分析，定性分析，SNP檢測(cè)等
實(shí)驗(yàn)報(bào)告
電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)
溶解曲線(xiàn) ·擴(kuò)增曲線(xiàn)
完整的實(shí)驗(yàn)過(guò)程、試劑、儀器及分析報(bào)告
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使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供無(wú)傳染性的 DNA 段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液，用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(試劑盒提供)，充分震蕩1分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個(gè)樣品，設(shè)置N+2個(gè)提取，多出的一個(gè)是PC（樣品制備陽(yáng)性對(duì)照），一個(gè)是 NC（樣品制備陰性對(duì)照）。可以用10μL陽(yáng)性對(duì)照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購(gòu)本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝，該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板，省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）
9. 如果做定量分析并且只做1次重復(fù)，則標(biāo)記N+9個(gè)PCR 管，其中N+2個(gè)用于上步得到的 N+2個(gè)樣品，1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照（用水做模板），6個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。如果做定性分析，并且只做1次重復(fù)，則標(biāo)記N+4 個(gè)PCR管，其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照（用水做模板），1個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照（用第4號(hào)管的陽(yáng)性對(duì)照稀釋液做模板）。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照，并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加）
NTB (Naltriben)3-己基噻吩 98%Human TOM70 ELISA Kit
N末端腦鈉肽前體1-甲基環(huán)戊 99%Human TMOD3 ELISA Kit
NubO（68-75），亞復(fù)合體4（68-75）2-甲基-4- 99%Human GNB3(Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(T) subunit beta-3) ELISA Kit
核輸出信號(hào)，NES,Dok - 1 (348 – 359)5-降烯-2-羧酸甲酯 96%Human MCHR2(Melanin-concentRating hormone receptor 2) ELISA Kit
核輸出信號(hào)NES,PKI甲基鋁氧烷 10 wt.% (1.5M) in tolueneHuman TOM70 ELISA Kit
肥胖抑制素，人1-甲基環(huán)己 96% Human GNB3(Guanine nucleotide-binding protein G(I)/G(S)/G(T) subunit beta-3) ELISA Kit
八面神經(jīng)肽3-甲氧基噻吩 98%Human TOMM6 ELISA Kit
阿片受體拮抗劑2-甲氧基噻吩 99%Human TOMM34 ELISA Kit
食欲素A，牛，人，大鼠，小鼠甲基納迪克酸酐 95%Human MT ELISA Kit
食欲素B，犬甲基納迪克酸酐 工業(yè)級(jí)（tech）Human TOMM7 ELISA Kit
食欲素B，人降烯二酸酐 99%Human TOP3A ELISA Kit
食欲素B，大鼠，小鼠1,3-雙(二苯基膦烷)二氯化鎳 99%Human TNS1 ELISA Kit
8，尾加壓素Ⅱ，人5-降烯-2- 99%Human TNIP2 ELISA Kit
孤啡肽RQ（孤菲肽）5-降冰烯-2-基乙酸酯(內(nèi)型和外型的混合物) 98%Human TNIP1 ELISA Kit
骨鈣素（1-49），人2-硝基芴 99%Human TNS3 ELISA Kit
駱駝源性成分探針?lè)?/font>PCR熒光定量試劑盒多核糖核苷酸核苷轉(zhuǎn)移酶1(PNPT1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)2-(叔丁氧羰基氧亞氨基)-2-苯乙(99%) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
帶粘蛋白(ZAN)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)2-(叔丁氧羰基氧亞氨基)-2-苯乙(99%) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
合子阻滯基因1(ZAR1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)1,2-苯二乙() 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
海藻糖酶(TREH)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)1,2-苯二乙() 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
脫氧尿苷三磷酸酶(DUT)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)1,2-苯二乙() 質(zhì)量規(guī)格：>98%,分子生物學(xué)級(jí)
Neurensin 1蛋白(NRSN1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)2-溴-1,3,5-三異基苯(96.0 %) 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR
Neurensin 2蛋白(NRSN2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)2-溴-1,3,5-三異基苯(96.0 %) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC
玻璃體蛋白(VIT)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)2-溴-1,3,5-三異基苯(96.0 %) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BS
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