NCI-H358人非小細胞肺癌細胞細胞系
英文名稱 | NCI-H358 | 規(guī)格 | 1×106cells |
種屬 | 人 | 生長特性 | 貼壁細胞 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 | 貨號 | E-XB6241 |
用途 | 僅供科研研究實驗 | 貨期 | 現(xiàn)貨 |
別稱 H358; H-358; NCIH358
種屬 人類
年齡（性別） 男性
組織來源 細支氣管及肺泡癌；非小細胞肺癌；肺；細支氣管；肺泡
生長特性 貼壁細胞
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
背景描述 NCI-H358細胞是于1981年從一位開始化療之前的患者的腫瘤組織中分離得到的。超微結(jié)構(gòu)研究表明，NCI-H358細胞的細胞質(zhì)中有Clara細胞的特征結(jié)構(gòu)，NCI-H358細胞表達主要的肺表面結(jié)合蛋白SP-A和RNA，不表達SP-B和SP-C；NCI-H358細胞在軟瓊脂中的克隆形成效率為0.83%。 生物安全等級 1 生長培養(yǎng)基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例 1:3-1:4 推薦換液頻率 2~3次/周 倍增時間 ~38-60小時 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ 致瘤性 Yes, the cells produce tumors in athymic nude mice. 基因表達情況 lung surfactant associated protein A (SP-A), The cells expressed protein and RNA of SP-A, the major lung surfactant associated protein. 保藏機構(gòu) ATCC; CRL-5807 ECACC; 95111733 |
1)復(fù)蘇細胞：將含有1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02% EDTA)于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤所有細胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細胞情況而定)，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml*培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3)細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，干冰運輸?shù)募毎麢z查干冰是否*揮發(fā)，細胞是否解凍，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。
2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關(guān)信息，如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題，責任由客戶自行承擔。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。.觀察好細胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置2-4h。
4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑?，個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。
7. 該細胞僅供科研使用。
8. 備注：運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。
9. 注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。
兔羊膜上皮細胞 | 大鼠骨髓瘤細胞Y3-Ag 1.2.3（種屬鑒定） |
人口腔成纖維細胞 | 人食管癌細胞TE-12(STR鑒定正確) |
人臍動脈內(nèi)皮細胞 | 人乳腺導(dǎo)管癌細胞T47D (STR鑒定正確) |
人臍靜脈平滑肌細胞 | 人肝癌細胞SNU-182(STR鑒定正確) |
人鼻腔黏膜上皮細胞 | 小鼠腎集合管細胞(SV40轉(zhuǎn)化)M-1（種屬鑒定） |
人喉黏膜上皮細胞 | 小鼠肺癌細胞-熒光 lewis+luc（種屬鑒定） |
人眼眶成纖維細胞 | 人胚胎干細胞 |
人頰黏膜成纖維細胞 | 小鼠垂體促甲狀腺濾泡星狀細胞TtT/GF(種屬鑒定) |
人根尖牙乳頭干細胞 | 人肝癌細胞帶綠色熒光 SMMC7721/GFP(STR鑒定正確) |
人結(jié)膜下囊成纖維細胞 | 大鼠腦I型星形膠質(zhì)細胞 CTX-TNA2（種屬鑒定） |
人胎盤微血管內(nèi)皮細胞 | 小鼠淋ba細胞白血病L1210(種屬鑒定) |
人羊膜上皮細胞 | 人結(jié)腸癌細胞CW-2(STR鑒定正確) |
人胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細胞 | NCI-H358人非小細胞肺癌細胞細胞系人皮膚黑色素瘤細胞SK-MEL-1(STR鑒定正確) |
人胎盤間充質(zhì)干細胞 | 人急性T淋ba細胞白血病細胞Jurkat(STR鑒定正確) |
人臍靜脈內(nèi)皮細胞 | 人胰腺癌細胞PANC-1(STR鑒定正確) |
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